Титр антитіл до нуклеарним антигенів (антинуклеарних фактор) в сироватці крові

У здорових людей титр АТ до нуклеарним Аг в сироватці крові 1: 40-1: 80 (клінічно значимий титр - gt; 1: 160 при використанні методу непрямої имму-нофлюоресценціі- при використанні скринінгових методів - нижче 1:50).

Антинуклеарних фактор - АТ до цілісного ядра. Це гетерогенна група аутоантитіл, що реагують з різними компонентами ядра. Визначення АТ до нуклеарним Аг в сироватці крові - тест на системні захворювання сполучної тканини. Скринінг на наявність антинуклеарних АТ в сироватці крові проводять методом радіоімунного аналізу (РІА), реакції зв`язування комплементу (РСК) або ІФА.

Позитивні результати скринінгу повинні бути підтверджені методом непрямої імунофлюоресценції. Як клітинного субстрату використовують препарати, приготовлені з суспензії клітин з великими ядрами [з людських клітин лінії нер-2 (human epithelial cells) - клітини раку гортані, або зрізів мишачої печінки]. Тип фарбування (характер розподілу флюоресцентной мітки в клітинах) при різних захворюваннях неоднаковий і визначає напрямок подальшого встановлення специфічності антинуклеарних АТ.

Дифузне фарбування (рівномірний розподіл мітки) найменш специфічно, можливо при ВКВ, лікарському волчаночном синдромі та інших аутоімунних захворюваннях, а також у літніх осіб. При дифузному фарбуванні клітин реакцію необхідно повторити з великим розведенням досліджуваної сироватки крові. Якщо тип фарбування залишається колишнім, найбільш ймовірно, що Аг, проти якого спрямовані антинуклеарні АТ, дезоксірібонук-леопротеід.

Гомогенне або периферичний фарбування спостерігають, коли в досліджуваній сироватці крові переважають АТ до двухспіральной ДНК. Цей тип фарбування найбільш часто виявляють при ВКВ.

Плямисте або крапчастий забарвлення обумовлено АТ до екстрагуються ядерним Аг і зазвичай спостерігається при змішаному захворюванні сполучної тканини, синдромі Шегрена, лікарському волчаночном синдромі.

ЯДЕРЦЕВОГО (нуклеолярное) фарбування (розподіл мітки в районі ядерець) обумовлено АТ до рибонуклеопротеидов. Цей тип фарбування характерний для системної склеродермії, зрідка можливий і при інших аутоімунних захворюваннях.

центромерная або дискретне крапчатості фарбування обумовлено АТ до центромере (спеціалізований домен хромосом) і характерно для CREST-синдрому та інших аутоімунних ревматичних захворювань.

Основна мета дослідження на антинуклеарні АТ - виявлення ВКВ, оскільки при цьому захворюванні вони з`являються в сироватці крові 95% хворих протягом 3 міс після його початку.

Визначення АТ до нуклеарним Аг має велике значення для діагностики колагенозів. При вузликовому поліартеріїт титр (при використанні скринінгових методів) може збільшуватися до 1: 100, при дерматоміозиті-ті - до 1: 500, при ВКВ - до 1: 1000 і вище. При ВКВ тест на виявлення антинуклеарних фактора має високий ступінь чутливості (89%), але помірною специфічністю (78%) в порівнянні з тестом на визначення АТ до нативної ДНК (чутливість 38%, специфічність 98%). АТ до нуклеарним Аг високоспецифічні для ВКВ. Збереження високого рівня АТ протягом тривалого часу - несприятлива ознака. Зниження титру віщує ремісію або (іноді) летальний результат.

При склеродермії частота виявлення АТ до нуклеарним Аг складає 60-80%, однак титр їх нижче, ніж при ВКВ. Між титром антінуклеар-ного фактора в крові і ступенем тяжкості захворювання взаємозв`язок не простежується. При ревматоїдному артриті часто виділяють ВКВ-подібні форми перебігу, тому досить часто виявляють АТ до нуклеарним Аг. При дерматомиозите АТ до ядерних Аг в крові виявляють в 20-60% випадків (титр до 1: 500), при вузликовому поліартеріїт - в 17% (1: 100), при хворобі Шегрена - в 56% при поєднанні з артритом і 88% випадків при синдромі Гужеро-Шегрена. При дискоїдний червоний вовчак антінук-леарний фактор виявляють у 50% хворих.

Крім ревматичних захворювань, АТ до ядерних Аг в крові виявляють при хронічному активному гепатиті (в 30-50% випадків), причому

Мал. Алгоритм діагностики ревматичних захворювань [Lehman C.A., 1998]

Мал. Алгоритм діагностики ревматичних захворювань [Lehman C.A., 1998]

їх титр іноді досягає 1: 1000. Аутоантитіла до нуклеарним Аг можуть з`явитися в крові при інфекційному мононуклеозі, гострих і хронічних лейкозах, придбаної гемолітичної анемії, хвороби Вальденстрёма, цирозі печінки, біліарному цирозі печінки, гепатитах, малярії, лепрі, ХНН, тромбоцитопеніях, лімфопроліферативних захворюваннях, міастенії і Тімом.

Майже в 10% випадків антинуклеарних фактор виявляють у здорових людей, але в низькому титрі (не більше 1:50).

В останні роки був розроблений імуноферментний метод визначення антинуклеарних АТ різного спектру, який відрізняється простотою виконання і поступово витісняє імунофлюоресцентним метод.

Цілий ряд ЛЗ може призводити до хибнопозитивного підвищення титру антинуклеарних АТ: аміносаліцілати, карбамазепін, ізоніазид, метилдопа, прокаїнамід, іодіди, оральні контрацептиви, тетрацік-Ліни, тіазидні діуретики, сульфаніламіди, ніфедипін, р-адренобло-Каторі, гидралазин, пеніциламін, нитрофурантоин і ін., внаслідок здатності цих препаратів викликати інтерференцію при проведенні дослідження.