Аналітична варіація

Великий вплив на результати лабораторних досліджень надає аналітична варіація використовуваного методу дослідження. Основні критерії, за якими оцінюють метод дослідження, - точність, відтворюваність, специфічність, чутливість.

Відео: Розрахунок дисперсії, середньоквадратичного відхилення, коефіцієнта варіації в Excel

Точність характеризує достовірність методу у визначенні точного значення величини (концентрації) речовини. Наприклад, систематична різниця між результатами визначення натрію в одній пробі більше 3 ммоль / л вважають неприйнятною. З іншого боку, більш значна різниця між концентраціями деяких гормонів, які визначаються ІФА з різними АТ, вважають прийнятною, так як використання різних препаратів АТ дає різні матричні ефекти. З цієї причини встановлюють різні інтервали референтних величин для окремих імуноферментних методів визначення гормонів.

Відтворюваність методу оцінюють шляхом вимірювання концентрації речовини в одній і тій же пробі кілька разів в один день і в одній серії проб. На наступний день роблять такі ж вимірювання з тієї ж самої пробою. Зазвичай відхилення при вимірах підкоряються закону Гаусса, що свідчить про стабільність методу. Для кожного ряду вимірювань розраховують середню величину (Хср). Потім знаходять різницю між значенням кожного вимірювання і цієї середньої і розраховують середньоквадратичне відхилення (S) і коефіцієнт варіації (V). Визначають коефіцієнт варіації в інші дні, і якщо він не перевищує 5%, то метод дослідження вважають адекватним. Для ферментів V може досягати 10%. В обов`язок кожної лабораторії входить перевірка відтворюваності методів, яку оцінюють за величиною стандартного відхилення (SD). Наприклад, відтворюваність при визначенні концентрації загального ХС в сироватці крові в хорошій лабораторії зазвичай становить в середньому +0,13 ммоль / л. Відомо, що 95% довірчий інтервал становить + 2SD, що в даному випадку відповідає 0,26 ммоль / л. Таким чином, кожен результат вважають істинним, якщо він знаходиться в межах цих кордонів (+0,52 ммоль / л). Так, концентрація загального ХС в сироватці крові 5,18 ммоль / л означає, що істинне значення знаходиться в межах між 4,92 і 5,44 ммоль / л.

Специфічність - здатність методу вимірювати лише той компонент, для визначення якого він призначений. Для оцінки аналітичної специфічності використовують домішки, які, виходячи з хімічної структури, є репрезентативними представниками тих груп речовин, які з фізіологічної точки зору мають

практичне значення. Більшою мірою це відноситься до ЛЗ, які можуть викликати хімічну інтерференцію в ході виконання аналізу. Низька специфічність і вплив інтерференції призводить до отримання неправильного результату (не плутати зі специфічністю методу щодо патології).

Аналітична чутливість методу - найменша кількість речовини (найменша концентрація), яке можна виявити цим методом. Це поняття слід відрізняти від чутливості методу щодо виявлення певної патології. При виборі методу дослідження необхідно звертати найпильнішу увагу на аналітичну чутливість методу, так як від цього залежить якість результатів досліджень. Так, наприклад, Наказом МОЗ РФ № 282 від 28.09.98 р «Про використання імуноферментних систем для виявлення поверхневого Аг вірусу гепатиту В (HB_sAg) і АТ до вірусу гепатиту С (анти-ВГС) у сироватці крові людини »заборонено використовувати тест-системи для виявлення HBsAg, чутливість яких перевищує 0,5 нг / мл, а також тест-систем для виявлення анти-ВГС, що не мають в своєму складі білків, кодованих NS3 зоною РНК вірусу гепатиту С. Використання тест-систем для виявлення HBsAg з чутливістю вище 0,5 нг / мл і не містять в своєму складі білків, кодованих NS3 зоною РНК вірусу гепатиту с, призводить до того, що вірусні гепатити В і С у ряду пацієнтів не діагностують.

Аналітична варіація, що залежить від застосовуваних методів і умов їх виконання, розширює межі нормальних лабораторних показників та цим обмежує можливість лабораторних тестів розрізняти здоров`я і хвороба. Тому фахівці лабораторії повинні прагнути зменшити аналітичну варіацію. У табл. наведені максимально допустимі межі аналітичної варіації (розкиду) аналізованих компонентів.

Наведені в табл. значення допустимої аналітичної варіації (V) розглядають як середні орієнтовні величини. Дані варіації, наведені для лейкоцитів і еритроцитів, відносяться до підрахунку клітинних елементів ручними методами, при використанні гематологічних аналізаторів коефіцієнт аналітичної варіації для лейкоцитів становить 1-3%, для еритроцитів - 1-2%, тромбоцитів - 2-4% [Elevitch F.R. et al., 1987 Koepke J.A., 1993].

Підтвердженням того, що аналітична варіація методу може мати суттєвий вплив на результати дослідження, служать наведені в табл. дані 95% -го довірчого інтервалу при підрахунку лейкоцитарної формули крові, отримані на підставі статистичного аналізу.

Таким чином, при оцінці результатів лабораторних досліджень лікарю необхідно враховувати все різноманіття факторів, що впливають на результати, знати аналітичну надійність лабораторних методів дослідження, тобто бути впевненим в точності одержуваної з їх допомогою інформації про відповідні компоненти біоматеріалу. Знання ступеня варіабельності результатів досліджень важливо і для зіставлення їх з біологічної варіабельністю, а також для зіставлення з клінічно значущими зрушеннями лабораторних показників. Ці критерії визначають при розробці методів, вказують в їх описі, і в разі потреби лікар лабораторії повинен інформувати про це клініциста.

Таблиця Максимально допустимі межі аналітичної варіації (розкиду) для різних компонентів (Компендіум методів лабораторної діагностики, 1984 р 6.1. CMLD)

Клініцисту на технічному і біологічному рівнях оцінки результатів лабораторних досліджень необхідно враховувати наступні факти.

Відео: Види угруповань

Зіставлення результату аналізу з референтним діапазоном відповідних величин вказує тільки на ймовірність відповідності або невідповідності цього результату нормі.

Існують фізіологічні відмінності нормальних величин і фізіологічні варіації день від дня (біологічна варіація).

Існують невеликі, обумовлені технічними причинами відмінності в результатах аналізів, отриманих в різні дні (аналітична варіація методу).

Референтні діапазони можуть змінюватися при використанні різних лабораторних методів.

Відео: ГлавРадіоОнлайн №43 Кінець України. Путін і економіка. майбутнє Придністров`я

Зміна змісту досліджуваного компонента можуть бути неспецифічними і не пов`язаними з первинним порушенням метаболізму цього компонента (інтерференція, гемоліз, ліпемія, прийом ЛЗ та ін.).

Існують випадкові варіації, причини яких в даний час не з`ясовані, але їх слід враховувати при інтерпретації результатів повторних аналізов- наприклад, щоденні варіації концентрації заліза в крові дуже великі і можуть ускладнювати виявлення закономірностей змін цього компонента.

При дослідженні плазми або сироватки крові одержують відомості про позаклітинних концентраціях досліджуваних компонентів. Ці концентрації залежать від кількості води в позаклітинному просторі по відношенню до кількості вимірюваного компонента і не завжди можуть відображати внутрішньоклітинних рівень досліджуваних речовин.