Методи аналізу структури днк

Відео: Відкриття структури ДНК - Максим Франк-Каменецький

Одна з таких маніпуляцій, може бути, найважливіша в програмі «Геном людини», полягає у визначенні послідовності нуклеотидів (секвенування). Саме дана процедура дозволяє, зокрема, розшифрувати структуру гена, встановити природу мутацій в ньому, визначити амінокислотнихпослідовність в молекулі білка, кодованого цим геном.

Відео: Як самостійно взяти аналіз ДНК

Найбільш поширеним методом, який використовують для секвенування ДНК, є метод, розроблений Сенгером. Цей метод називається ще дідезоксі-методом, оскільки в ньому застосовують дідезоксінуклеотіди для термінації (обриву) синтезу ланцюга ДНК. В результаті дідезоксінуклеотід, приєднавшись до ланцюга ДНК, цей синтез припиняє. Щоб здійснити вивчення фрагмента ДНК, його спочатку розділяють на дві нитки.

Оскільки приєднання дідезоксінуклеотіда відбувається випадково, так як в реакційній суміші є його нормальний аналог, то в кожній пробірці утворюється набір ланцюгів різної довжини.

Реалізація програми «Геном людини» зажадала розробки більш швидких методів вивчення ДНК. Були розроблені на основі тільки що викладеного принципу методи автоматичного визначення, в яких використовують мічення флюоресцентной або хемілюмінесцентний міткою, яка виникає спеціальної лазерною системою виявлення мітки під час електрофорезу. Сигнали з лазерної системи детекції надходять в комп`ютер, де на основі спеціальної програми вони інтерпретуються в термінах нуклеотидів, які охоплюють піками різного кольору на моніторі комп`ютера. Автоматичні секвенатори (пристрої, завдяки яким розпізнається молекула ДНК) дозволяють прискорити отримання результатів вивчення ДНК в десятки або навіть сотні разів у порівнянні з ручним сиквенс.