Імунологічні методи

Останнім часом в якості важливого імунологічного маркера попу-ляціонному генетики стали розглядати головний комплекс гістосовмес-тімості - HLA (Human Leukocyte Antigens). Аг цієї системи визначають імунологічно в лейкоцитах крові. Комплекс генів HLA компактно розташований на короткому плечі хромосоми 6 (6р21.3). Локалізація цієї системи і протяжність розташування її локусів на хромосомі дозволили розрахувати, що комплекс складає приблизно 1/1000 генофонду організму. Аг гістосумісності беруть участь в регуляції імунної відповіді організму, в підтримці імунного гомеостазу. Завдяки своєму поліморфізму і компактності локалізації Аг HLA набули великого значення як генетичного маркера.

В даний час виявлено понад 200 алелей цієї системи, вона є найбільш полиморфной і біологічно значущою з генетичних систем організму людини. Порушення різних функцій головного комплексу гістосумісності сприяють розвитку ряду захворювань, в першу чергу аутоімунних, онкологічних, інфекційних.

У відповідності з розташуванням комплексу HLA в хромосомі 6 розрізняють наступні локуси: D / DR, B, C, A. Порівняно недавно виявлені нові локуси G, E, H, F, їх біологічну роль активно вивчають в даний час. У головному комплексі гістосумісності виділяють три класи Аг. Аг I класу кодуються локусами А, В, С. Нові локуси також відносяться до цього класу. Аг II класу кодуються локусами DR, DP, DQ, DN, DO. Гени I і II класів кодують Трансплантаційні Аг. Гени III класу кодують компоненти комплементу (С2, С4а, С4Ь, Bf),

Мал. Схема розташування локусу головного комплексу гістосумісності на короткому плечі хромосоми 6 людини

а також синтез изоформ ряду ферментів (фосфоглюкомутази, глікоксіла-зи, пепсиногену-5, 21-гідроксилази).

Наявність у людини асоційованих з певним захворюванням Аг дозволяє припускати підвищену схильність до даної патології, а при деяких кореляції, навпаки, стійкість до неї.

Визначення Аг системи HLA проводять на лімфоцитах, виділених з периферичної крові, за допомогою гістотіпірующіх сироваток в мікро-лімфоцітотоксіческой реакції або молекулярно-генетичними методами.

Мал. Схема розташування локусу головного комплексу гістосумісності на короткому плечі хромосоми 6 людини

Відео: божедомамі В А - Хронічний простатит клінічні та імунологічні аспекти

Встановлення асоціативних зв`язків між хворобами і Аг головного комплексу гістосумісності дозволяє:

виділити групи підвищеного ризику розвитку хвороби;

визначити її поліморфізм, тобто виявити групи хворих з особливостями течії або патогенезу хвороби-в цьому ж плані може проводитися аналіз сінтропіі хвороб, з`ясування генетичних передумов поєднання різних форм патологіі- асоціація з Аг, що визначають стійкість до захворювань, дозволяє виявляти осіб зі зниженим ризиком виникнення даної патології;

проводити диференційну діагностику захворювань;

Відео: Нові методи лікування СНІДу. Мозковий штурм

визначати прогноз;

виробити оптимальну тактику лікування.

У зв`язку з тим, що для більшості хвороб прямого зв`язку з Аг головного комплексу гістосумісності не простежується, для пояснення асоціацію між захворюваннями і Аг HLA була запропонована теорія «двох генів», згідно з якою передбачається існування гена (генів) імунної відповіді (Ir-гена) , тісно пов`язаного з Аг HLA і генами, які регулюють імунну відповідь. Гени-протектори визначають резистентність до захворювань, а гени-провокатори - чутливість до тих чи інших хвороб.

У табл. наведені дані про зв`язок між різними захворюваннями і наявністю Аг головного комплексу гістосумісності. Відносний ризик захворювання для осіб з відповідним генотипом розраховують за формулою: x = [h_p х (1 - h_c)] / [H_c х (1 - h_p)], Де h_p - Частота ознаки у хворих, а h_c - У осіб контрольної групи.

Відносний ризик показує величину асоціації захворювання з певним Аг / Аг системи HLA (дає уявлення про те, у скільки разів вище ризик виникнення захворювання при наявності Аг в порівнянні з його відсутністю). Чим більше цей показник у пацієнта, тим вище асоціативний зв`язок із захворюванням.

Таблиця Асоціація хвороб людини з HLA-Аг (частота гена,%) [Йегер Л., 1990 Фролькіс А.В., 1995 Петрова М.А., 1997]

Відео: Приготування фіксованого мазка і фарбування по Граму

Таблиця Асоціація хвороб людини з HLA-Аг (частота гена,%) [Йегер Л., 1990 Фролькіс А.В., 1995 Петрова М.А., 1997]

Продовження табл.

Продовження табл.

Закінчення табл.

Відео: Техніка бактеріологічного посіву

Закінчення табл.

Дані, наведені в таблиці 10-2, показують, що найбільш сильні асоціативні зв`язки виявляються для хвороб з полігенним або мульти-факторіальним типом успадкування.

Таким чином, визначення Аг головного комплексу гістосумісності на клітинах крові (лейкоцитах) дозволяє виявити ступінь індивідуальної схильності людини до певного захворювання, а в ряді випадків використовувати результати досліджень для диференціальної діагностики, оцінки прогнозу і вибору тактики лікування. Наприклад, виявлення Аг HLA-B27 використовують в диференціальної діагностики аутоімунних хвороб. Його виявляють у 90-93% пацієнтів європеоїдної раси з анкілозивний спондиліт і синдромом Райтера. У здорових представників цієї раси Аг HLA-B27 виявляють все в 5-7% випадків. Аг HLA-B27 часто виявляють при псоріатичний артрит, хронічних запальних захворюваннях кишечника, що протікають з сакроілеі-те і спондилітом, увеіте і реактивному артриті.